Tris缓冲能力:
Tris为弱碱,在25°C下,它的pKa为8.1;根据缓冲理论,Tris缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0到9.2之间。0.1mol/l的水溶液pH为10.4,一般加入盐酸以调节pH值,即可获得所需pH值的缓冲液。但同时应注意温度对于Tris的pKa的影响对于 Tris 缓冲液,温度每降低 1°C,pH 增加约 0.03 个单位,浓度每稀释 10 倍,pH 降低 0.03-0.05 个单位。 对于精确应用,使用带有玻璃/甘汞复合电极的经仔细校正的 pH 计。Tris主要应用为:1. 1M Tris-HCl 6.8、1.5M Tris-HCl 8.8和5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液是SDS-PAGE最常用的试剂。2. 在Tris盐酸缓冲液中加入EDTA制成“TE缓冲液”,TE缓冲液被用于DNA的稳定和储存。将调节pH值的盐酸换为乙酸即可以得到“TAE(Tris/Acetate/EDTA)缓冲液”,换成硼酸则获得“TBE(Tris/Borate/EDTA)缓冲液”。TAE和TBE缓冲液常用于核酸电泳实验中。3. 其他的应用:Tris被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长。Tris缓冲液的低离子强度特点可用于线虫(C. elegans)核纤层蛋白(lamin)的中间纤维的形成。使用注意事项:若吸入、摄入、皮肤吸收,对身体有害,使用时注意防护。
Tris缓冲液不仅被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂,还有许多重要用途。Tris被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长。Tris缓冲液的低离子强度特点可用于线虫(C. elegans)核纤层蛋白(lamin)的中间纤维的形成。Tris也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一,其在电泳缓冲液中与甘氨酸构成缓冲体系,稳定电泳过程中的PH。此外,Tris还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物。Tris也被用作滴定标准物。 作为蛋白缓冲液时,若后续工作需要质谱,则不适宜用Tris,最好换成其他质谱仪可耐受的缓冲液。
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