2C20H20N3O·SO4=732.85
产品描述:
耐尔蓝A是一种脂溶性苯氧嗪类染料,常用于生物染色(如脂滴、溶酶体、细菌染色)或作为氧化还原指示剂。
常见应用:
细胞或组织切片中脂质和酸性细胞器的染色(如溶酶体)。
细菌活死染色(需结合其他染料)。
光动力疗法研究(光敏剂)。
纯度说明:
75%纯度可能含少量杂质(如未反应的中间体),需根据实验需求判断是否需进一步纯化。
溶解建议:
1. 溶剂选择:
推荐溶剂:
乙醇或甲醇(首选):溶解性好,适合脂溶性应用(如脂滴染色)。
DMSO:可先溶解为高浓度母液(如10 mg/mL),再用缓冲液稀释至工作浓度。
去离子水(需加热辅助):适用于水溶性实验,但溶解度较低(可能需超声助溶)。
溶解步骤:
称取适量Nile Blue A粉末,加入溶剂后涡旋或超声(30-60秒)至完全溶解。
若使用水溶解,建议加热至50-60℃促进溶解,冷却后过滤(0.22 μm滤膜)。
2. 建议浓度:
通用工作液 :脂质染色 :0.1-1 μg/mL(稀释于PBS或细胞培养基)。
细菌/细胞染色 :1-5 μg/mL(根据样本类型优化)。
光敏实验 :10-50 μM(需根据摩尔浓度换算)。
母液配制 :建议配制1-5 mg/mL的储存液(如溶于乙醇或DMSO),分装避光冻存(-20℃)。
使用说明:
1. 染色步骤示例(以细胞脂滴染色为例):
① 细胞固定:用4%多聚甲醛固定细胞15分钟,PBS洗涤3次。
② 染色:加入0.5μg/mL Nile Blue A(溶于PBS或培养基),37℃避光孵育10-30分钟。
③ 洗涤:用PBS或生理盐水洗涤3次,去除未结合的染料。
④ 观察:荧光显微镜下检测(激发波长:630-650 nm,发射波长:660-680 nm)。
2. 注意事项 :
避光操作:染料对光敏感,染色全程需避光。
浓度优化:高浓度(>5 μg/mL)可能导致非特异性染色,需预实验确定最佳浓度。
毒性控制:活细胞染色时,孵育时间不宜过长(建议<30分钟),避免细胞损伤。
杂质干扰 :75%纯度可能影响荧光信噪比,若需高灵敏度检测,建议选用≥95%纯度产品。
储存条件 :粉末:避光、干燥、-20℃保存,避免吸潮。
溶液: 短期:4℃避光保存,1周内使用。 长期:分装冻存于-20℃(避免反复冻融)。
安全提示:
1.佩戴手套和护目镜,避免直接接触皮肤或眼睛。
2.废弃物需按实验室化学污染物处理规范处置 |