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总多糖含量测定试剂盒(分光光度法)

Catalog No.： TOPEK03495

Storage Condition： 4℃

Shelf Life： 6个月

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Catalog No.	Specification	List Price	Preferential Price	VIP	Beijing	Harbin	Shenyang	Guangzhou	Quantity	Cart
TOPEK03495	50T/48S	$75.68

Product Name

Introduction：

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：

多糖是生物体中广泛存在的物质，是一类由醛糖或酮糖通过糖苷键连接而成的天然高分子多聚物，它是生物体内重要的生物大分子，是维持生命活动正常运转的基本物质之一。

测定原理：

利用水提醇沉法提取总多糖，苯酚-硫酸法测定总多糖含量。

组成：

产品名称	50T/48S	Storage
试剂一：液体	12ml	4℃
试剂二：无水乙醇,自备	--	--
试剂三：浓硫酸，自备	--	--
说明书	一份

自备仪器和用品：可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1ml玻璃比色皿、无水乙醇、浓硫酸、蒸馏水、水浴锅。

总多糖提取：

样本烘干粉碎，称取约0.05g样本，加入1ml水，充分匀浆。100℃水浴提取2h（必须盖紧盖子防止水分流失），冷却后10000g离心10min，取上清。吸取0.2ml上清，慢慢加入0.8ml无水乙醇，混匀后4℃静置过夜，10000g离心10min，弃上清，沉淀中加入1ml水，充分混匀溶解沉淀。

测定步骤：

1、分光光度计预热30min以上，调节波长至490nm，蒸馏水调零。

2、吸取400µl上清，加入200µl试剂一和1ml浓硫酸，混匀后90℃水浴20min，流水冷却。取1ml加入比色皿，于490nm下测定吸光值A。

总多糖含量计算：

以葡萄糖作为对照品，标准条件下测定回归方程为y = 15.962x - 0.0037，R² = 0.9973，x为葡萄糖含量（mg/ml），y为吸光值。

总多糖含量(μg/g干重)= (A +0.0037)÷ 15.962×V1÷V2×V3÷W×1000

=313.24×(A+0.0037) ÷W

V1：醇沉后重新溶解后的体积，1ml；V2：进行醇沉的体积，0.2ml；V3，提取时加入水的体积，1ml；W：样本质量，g；1000，mg到μg的换算系数。

These protocols are for reference only. Biotopped does not independently validate these methods.

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总多糖含量测定试剂盒(分光光度法)

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